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在使用超微量核酸蛋白测定仪的过程中我们容易对它造成什么误区

点击次数:1133    发布时间:2018-10-19

   在使用超微量核酸蛋白测定仪的过程中我们容易对它造成什么误区
  
  超微量核酸蛋白测定仪设计特点:
  
  1、双光束、高精度、多色器光学检测系统,像差校正光栅和二极管阵列检测器提供可靠的检测结果
  
  2、检测光程固定,仪器内部没有移动的光学部件,检测光程为10mm。
  
  3、采用超长寿命的氙闪灯,开机后无需预热即可工作
  
  4、可选配5.7英寸彩色触摸控制器进行单机操作,也可连接电脑操作
  
  超微量核酸蛋白测定仪应用:
  
  用于生命科学领域的核酸蛋白定量分析,如进行DNA、RNA、蛋白质、细胞等样品的紫外/可见光检测。
  
  数据多种导出格式(EXCEL、PPT等)方便保存和数据统计分析。
  
  超微量核酸蛋白测定仪注意事项:
  
  1、侦测后立即使用拭镜纸擦拭台面。先取一张将上下台面的液体吸走,再吸过样品的面反折到内部,折迭四次后以单方向多次擦拭台面(DNA擦5次,Protein擦20次)。
  
  2、同一滴液体只能做一次侦测,欲重复定量同一样品,请擦掉前一滴,重新取出一滴进行侦测。
  
  3、基本上核酸样品可使用1~2ul做测量,随各液体体积特性之不同会有不同体积需求,原则上不超过2ul。并请使用2ul避免体积不足导致液柱无法完整形成。唯蛋白质样品因呈色剂与蛋白质本身特性,务必使用2ul进行侦测。
  
  4、当软件跳出错误讯息时,请详细阅读并依指示进行障碍排除。常发生的情形是在侦测过程液柱并未正确形成,软件会出现以下讯息。可先用肉眼观察液柱是否未完整连接上下台面,或样品内有泡泡,将上臂拉起后,擦掉该滴样品,再重新进行侦测,必要时可将样品体积加大至2ul。
  
  5、不可使用含有HydrofluoricAcid(HF)之样品,其它无腐蚀性之液体皆可使用。
  
  超微量核酸蛋白测定仪的使用误区:
  
  1)测量核酸时发现结果不准:首先要确定核酸样品的纯度,如果是DNA样品,260/280比值应该在1.6-2.0之间。比值小于1.6说明有蛋白类物质的干扰,大于2.0说明有RNA的干扰。如果是RNA样品,260/280应该大于2.0,如果值偏高如2.5以上,可能是RNA降解的原因,如果小于2.0说明有蛋白类物质的干扰。我们还可以通过230nm、和320nm处的吸收峰来判断样品的纯度,230表示存在以下污染物如:碳水化合物、多肽、苯酚等,核酸和蛋白在320nm处的吸收峰几乎为零,所以如果有吸收说明有杂质,可能是稠环芳香有机试剂的污染。
  
  2)适合测量纯度高的蛋白样品,不能测量含有杂质的蛋白样品:通过上面的公式我们能够发现,c值是与吸光度A成正比的,如果样品中含有杂质成分,且杂质在280处有吸收峰的话就会造成测量值不准,一般我们提蛋白过程中使用的有机试剂如果残留的话就会造成测量蛋白值不准的情况。
  
  3)测量两个样品中间务必要用吸水的面巾纸和蒸馏水清洁测量臂:如果不做清洁,残留的样品会对后来样品的测量造成影响。切记不要用擦镜纸擦拭,因为擦镜纸不吸水。
  
  4)测量同一个样品的时间不宜过长:因为上样量很少,随着时间的推迟样品会有所蒸发,造成测量出来的浓度有误差。
  
  5)如果测量值不是很准,建议可以把样品稀释到适当浓度再进行测量。
  
  6)如果感觉机器的平衡性不好,可以通过以下方法检测:以空气为blank,反复测量空气,两次测量之间间隔5秒,测出的吸光度值应该小于0.04,说明平衡性良好。
  
  
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