超微量核酸蛋白测定仪是基于朗伯-比尔定律，通过检测微量样品(0.5-2 μL)在特定波长下的吸光度(A260/A280/A320)或荧光信号，快速定量核酸(DNA、RNA)浓度与纯度、蛋白质浓度的精密光学仪器。其核心优势在于样品用量少、检测速度快、灵敏度高(核酸检测限可达0.1 ng/μL，蛋白质可达0.01 mg/mL)，广泛应用于分子生物学、基因测序、蛋白质组学、临床诊断等领域。
然而，超微量测定仪的光学系统(光源、检测器、比色皿)、液路系统(微量进样)对环境敏感度高(如灰尘、温度、湿度、样品残留)，长期使用易出现吸光度漂移、基线噪声增大、进样故障等问题。科学的维护与精准的故障排除是保障数据可靠性的关键，本文结合仪器原理与工程实践，系统解析维护策略与故障诊断技术。
1. 核心结构
光学系统：氙灯/LED光源(覆盖紫外-可见光区，如200-800 nm)、单色器(光栅分光)、样品臂(微量样品台)、检测器(光电二极管阵列或CCD)；
液路系统：微量进样针(陶瓷/不锈钢材质，内径≤0.5 mm)、废液槽、蠕动泵(控制进样量)；
控制系统：微处理器(控制光源强度、检测器增益)、软件(数据采集与分析，如浓度计算、纯度评估)。
2. 工作原理
核酸定量：DNA/RNA在260 nm处有特征吸收峰，纯DNA的A260/A280≈1.8，纯RNA≈2.0(比值偏离提示蛋白质/酚类污染)；
蛋白定量：蛋白质在280 nm处因色氨酸/酪氨酸残基吸收，或通过BCA、Bradford等显色反应的可见光吸收定量；
超微量检测：通过“液柱成像”技术(样品在石英比色皿中形成稳定液柱，避免液面反射干扰)，结合高灵敏度检测器实现微量样品的高精度检测。
二、超微量核酸蛋白测定仪的维护策略
维护核心是“光学系统防污染、液路系统防堵塞、环境参数稳控制”，需按“日常维护—定期保养—长期停用维护”分级执行。
1. 日常维护（每日/每次使用后）
(1)光学系统清洁
样品台与比色皿：用无尘布蘸取75%乙醇(或异丙醇)轻轻擦拭石英比色皿内壁与样品台表面，去除残留样品(如核酸溶液干燥后形成的结晶)；禁用丙酮、氯仿等有机溶剂(腐蚀石英)。
光源窗口：用吹气球(皮老虎)吹去表面灰尘，若有顽固污渍，用棉签蘸取少量无水乙醇轻拭(避免触碰光栅/透镜)。
(2)液路系统排空与清洗
废液槽清空：每次使用后打开废液槽，用移液器吸尽废液(避免废液挥发腐蚀部件)；
进样针清洗：执行“自动清洗程序”(仪器内置)，或手动用缓冲液(如TE缓冲液或蒸馏水)冲洗进样针3-5次(防止样品残留堵塞针尖)；若检测过高浓度样品(如>1000 ng/μL DNA)，需用0.1 M NaOH溶液浸泡进样针10分钟后冲洗(去除蛋白/核酸吸附)。
(3)环境与状态检查
温湿度：确保实验室温度18-25℃、湿度40%-60%(湿度>70%易凝结水汽，影响光学系统；<30%易产生静电吸附灰尘)；
开机自检：观察仪器自检界面，确认光源强度(如氙灯能量≥标称值的80%)、检测器噪声(基线漂移≤0.002 A/h)正常。
2. 定期保养（每周/每月）
(1)光学系统深度校准
波长校准：每月用钬玻璃滤光片(特征吸收峰241 nm、361 nm、536 nm)或标准溶液(如维生素B12，361 nm处有特征峰)校准单色器波长精度(偏差≤±1 nm)；
吸光度校准：用重铬酸钾标准溶液(A440=0.536)或去离子水(A320≤0.002)校准吸光度零点与线性(线性相关系数R²≥0.999)。
(2)液路系统维护
蠕动泵管更换：每月检查泵管(硅胶材质)弹性，若出现裂纹、变硬(按压无回弹)，立即更换(泵管老化会导致进样量不准，如设定2 μL实际进样1.5 μL)；
废液泵清洁：若废液排放缓慢，拆开废液泵，用注射器吸取无水乙醇冲洗泵体(去除结晶或生物膜)。
(3)机械部件润滑
进样针导轨：用无水乙醇擦拭导轨后，涂抹硅基润滑脂(禁用凡士林，易吸附灰尘)，确保进样针升降顺畅(无卡顿)。
3. 长期停用维护（＞1个月）
清洁：按日常维护流程清洁光学系统与液路系统，废液槽用75%乙醇浸泡30分钟后冲洗；
排空液体：断开进样泵电源，排空进样针与管路中的所有液体(防止结冰或滋生微生物)；
防尘保护：盖上仪器防尘罩，存放于干燥、避光环境(避免阳光直射光源导致老化)；
定期通电：每2周开机1次，运行自检程序与空白检测(去离子水)，维持光源与检测器活性。
三、常见故障诊断与排除技术
故障诊断需遵循“现象观察—参数溯源—部件排查”三步法，结合仪器日志(如光源能量、进样次数、错误代码)定位根因。
1. 故障1：吸光度值异常（偏高/偏低/波动大）
(1)现象描述
空白样品(去离子水)A320>0.005(正常≤0.002)；
同一样品重复检测，吸光度偏差>5%；
核酸样品A260/A280偏离1.6-2.0(如纯DNA样品比值<1.7，提示蛋白污染)。
(2)可能原因与排除
| | |
| 检测空白样品，若A320持续偏高，用乙醇擦拭后仍无改善，可能是光源老化或检测器噪声增大。 | 清洁光学部件后，若无效，联系厂家更换光源（氙灯寿命约2000小时）或检测器。 |
| 查看仪器日志，若光源能量＜标称值的60%（如氙灯标称1000 W，实际＜600 W）。 | |
| 检测高浓度样品后，若空白样品吸光度逐渐升高，可能是进样针或管路残留样品。 | 执行3次自动清洗程序，手动用NaOH溶液浸泡进样针10分钟，再用缓冲液冲洗。 |
| 用标准体积校准液（如2 μL荧光微球溶液）检测，若浓度偏差＞5%，提示进样量不准。 | 检查蠕动泵管是否老化（更换泵管），校准进样体积（仪器内置校准程序）。 |
2. 故障2：基线噪声大（吸光度波动＞0.001 A）
(1)现象描述
检测空白样品时，吸光度曲线呈锯齿状或持续波动(正常基线应平稳，波动≤0.0005 A)；
低浓度样品(如<10 ng/μL DNA)检测时，信号信噪比<10:1(无法准确定量)。
(2)可能原因与排除
| | |
| 关闭实验室空调、离心机等振动源，若噪声减小，说明是外部干扰。 | 仪器加装防震垫，远离大功率电器（如微波炉、UPS电源）。 |
| 检查仪器散热风扇是否正常运转，若风扇停转，检测器温度＞40℃（正常≤35℃）。 | 清理风扇滤网灰尘，更换散热硅脂（若风扇损坏，联系厂家维修）。 |
| 用标准滤光片检测，若特征峰强度下降＞20%，可能是光栅或透镜松动。 | 联系厂家工程师重新校准光路（需专业工具，禁止自行拆卸）。 |
3. 故障3：进样失败（样品未吸入或吸入量不足）
(1)现象描述
仪器提示“进样错误”(Error 101)，或检测结果显示“样品量不足”；
手动进样时，观察进样针无液体上升(正常应在0.5秒内吸入样品)。
(2)可能原因与排除
| | |
| 用细钢丝（如针灸针）轻轻疏通针尖（直径≤0.5 mm），若疏通后有样品流出，说明堵塞。 | 用0.1 M NaOH溶液超声清洗进样针10分钟（功率200 W），再用蒸馏水冲洗。 |
| 检查泵管是否卡入泵槽（应平整贴合滚轮），若泵管偏移，会导致吸力不足。 | |
| 废液槽液位超过警戒线（通常标注“MAX”），导致废液倒吸进入进样系统。 | |
4. 故障4：软件报错（如“通信失败”“数据丢失”）
(1)现象描述
仪器与电脑连接时提示“COM口错误”，或检测数据无法保存/导出；
软件界面卡顿，无法启动检测程序。
(2)可能原因与排除
| | |
| 更换数据线，或换用其他COM口（电脑端），若恢复正常，说明连接线或接口故障。 | 更换高质量数据线（屏蔽线抗干扰），避免使用USB hub（直接连接电脑主板）。 |
| 查看仪器固件版本与软件版本是否匹配（如固件V2.0需搭配软件V5.0以上）。 | 从厂家下载最新驱动与软件，重新安装（注意备份原有数据）。 |
| 检查电脑硬盘剩余空间＜1 GB，导致数据无法写入。 | 清理硬盘，或更改数据存储路径至其他分区（如D盘）。 |
四、预防性维护与数据可靠性保障
1. 建立维护档案
记录每次维护的时间、内容(如更换泵管、清洁光学系统)、更换部件型号(如光源编号)、校准数据(如波长偏差、吸光度线性)，便于追溯设备状态。
2. 定期用标准品验证
每周用已知浓度的标准核酸/蛋白溶液(如Thermo Fisher NanoDrop标准品)检测，验证仪器准确性(偏差≤±5%为合格)；若连续3次偏差>5%，需停机检修。
3. 人员操作培训
规范操作：样品需无气泡(进样前轻弹管壁去除气泡)、浓度适中(避免超出线性范围，如DNA>2000 ng/μL需稀释)、避免用手直接接触比色皿透光面(指纹会影响吸光度)。
结语
超微量核酸蛋白测定仪的维护与故障排除是“细节决定精度”的典型体现：日常清洁需“轻、净、匀”，定期保养需“校准、更换、润滑”，故障排除需“溯源、验证、规范”。通过科学的维护策略与精准的诊断技术，可最大限度降低仪器故障率，确保检测数据的可靠性，为分子生物学研究、临床诊断等提供坚实的技术支撑。未来，随着仪器智能化(如AI预测性维护)与集成化(如联用荧光模块)的发展，维护与故障排除将更高效、更精准。
电子邮箱：
公司地址：北京市大兴区黄村镇狼垡二村村委会南800米